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FU Berlin
Digitale Dissertation

Stephan Wehrenfennig :
STICKOXIDSYNTHASE IM PERIPHEREN NERVENSYSTEM DER SCHILDKRÖTE TRACHEMYS SCRIPTA ELEGANS
NITRIC OXIDE SYNTHASE IN THE PERIPHERAL NERVOUS SYSTEM OF THE TURTLE TRACHEMYS SCRIPTA ELEGANS

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|Zusammenfassung| |Inhaltsverzeichnis| |Ergänzende Angaben|

Zusammenfassung

Die vorliegende Arbeit ist ein Beitrag zur Frage der phylogenetischen Einordnung von Stickoxid (NO) als Neurotransmitter im peripheren Nervensystem. Es wird die Lokalisation der Stickoxidsynthase (NOS) in der Schildkröte Trachemys scripta elegans als Vertreter der Reptilien analysiert. Um den Nachweis des Stickoxid bildenden Enzyms zu führen, wurde sowohl die histochemische Methode (NADPH-Diaphorase) als auch die indirekte Immunzytochemie mittels eines spezifisch gegen die neuronale Form der NOS gerichteten polyklonalen Antikörpers verwendet. Es sind zwar alle neuronalen Strukturen immunzytochemisch und histochemisch übereinstimmend markiert, jedoch zeigt das Steroidhormon-produzierende Gewebe der Nebennieren deutlich eine alleinige NADPHd-Diaphorase-Aktivität, die nicht als spezifisch für die Stickoxidsynthase gelten kann. Mittels beider Methoden konnten in dieser Arbeit übereinstimmend positive von nicht markierten Neuronenpopulationen unterschieden werden. Parasympathische Kopfganglien (Ganglion ciliare und palatinum) und sensorische Ganglienzellen (Ganglion trigeminale, Spinalganglien) enthalten stets Subpopulationen von nitrergen Neuronen, während in cervicalen sympathischen Ganglien (Ganglion cervicale superius, inferius) keine NOS-markierten Zellen vorkommen. Im Respirationstrakt befinden sich positive Neurone in direkter Umgebung von Larynx und Trachea, im Nervus laryngeus recurrens und in intrapulmonalen Ganglien. Kardiale Ganglien beinhalten wenige reaktive Neurone. Innerhalb des gesamten Magen-Darmtrakts sind eine beträchtliche Anzahl neuronaler Markierungen im Plexus myentericus und submucosus zu finden. Viele kleine positive Ganglien liegen im Gewebe der Nebennieren und entlang der Milzgefässe. Im Urogenitaltrakt befinden sich viele positiv markierte Nervenzellen und Nervenfasern in der Harnblase, den akzessorischen Blasen sowie vereinzelt auch in den Corpora cavernosa von Klitoris und Penis. Die Organe Leber, Niere, Pankreas und Thymus zeigten keine neuronalen Signale bis auf vereinzelte perivasculäre Markierungen. In der stammesgeschichtlichen Entwicklung gelten Reptilien als gemeinsame Vorläufer von Vögeln und Säugern. Nach herkömmlicher Auffassung gelten Schildkröten als den Vorläuferreptilien relativ nahe Abkömmlinge (Cruce et al. 1974; Powers et al. 1980). Daher sprechen die vorliegenden Ergebnisse für eine schon früh in der Evolution etablierte nitrerge Innervation nahezu aller Organe der Amnioten, die sich in wesentlichen Zügen auch bei den heutigen Säugern wiederfindet.

Inhaltsverzeichnis

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0. TITELBLATT, INHALT u. DANKSAGUNG
1. EINFÜHRUNG
1.1. Gliederung des peripheren Nervensystems 5
1.2. Neurotransmission im PNS 6
1.3. Synthese von Stickstoffmomoxid und Aufbau der Stickoxidsynthase 8
1.4. Enzymatischer Reaktionsablauf 11
1.5. Kolokalisation zu anderen Neurotransmittern 11
1.6. Spezifität der Antisera versus NADPH-Diaphorase-Aktivität 11
1.7. Steuerbarkeit und Funktion von NOS 12
1.8. Zielsetzung 13
2. MATERIAL UND METHODEN 14
2.1. Versuchstiere 14
2.2. Präparation 14
2.3. Anfertigung der Gewebeschnitte 15
2.4. Pufferlösungen 15
2.5. NADPH-Diaphorase-Histochemie 15
2.6. Indirekte Immunfluoreszenz 16
2.7. Peroxidase-Antiperoxidase 17
2.8. Kontrolluntersuchungen zu den immunologischen Versuchsreihen 18
2.9. Kontrolluntersuchungen zur Histochemie 18
2.10. Histologische Färbungen 19
2.11. Fotografische Dokumentation 21
2.12. Auswertung 22
3. ERGEBNISSE 23
3.1. Halsganglien 23
3.2. Sympathische Ganglien 26
3.3 Respiratorisches System 26
3.4. Verdauungstrakt 27
3.5. Ableitende Harnwege 31
3.6. Geschlechtsorgane 32
3.7. Drüsengewebe 33
3.8. Kardiovasculäres System 35
3.9. Lymphatische Organe 36
3.10. Nichtneuronale Markierungen 36
4. DISKUSSION 39
4.1. Methodik 39
4.2. Lokalisation von NO-Synthase im peripheren Nervensystem 43
5. ZUSAMMENFASSUNG 62
2. LITERATUR 64
7. ABKÜRZUNGEN 91
8. TABELLE UND ABBILDUNGEN 93
10. PUBLIKATION 114

Ergänzende Angaben:

Online-Adresse: http://www.diss.fu-berlin.de/2002/161/index.html
Sprache: Deutsch
Keywords: nitric oxide synthase, PNS, neurotransmission, turtle, NADPH diaphorase, NANC
DNB-Sachgruppe: 33 Medizin
Datum der Disputation: 11-Jun-2002
Entstanden am: Fachbereich Humanmedizin, Freie Universität Berlin
Erster Gutachter: Privat Dozent Dr. Gerold Brüning
Zweiter Gutachter: Prof. Dr. Ulrich Dirnagl
Kontakt (Verfasser): wehrenfennig@web.de
Abgabedatum:05-Aug-2002
Freigabedatum:26-Aug-2002

 

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