FU Berlin Digitale Dissertation
Maren Hofmeier : Comparison of the expression of p53 and MUC2 in mucinous and nonmucinous carcinomas of the breast, pancreas, ovary and colon and investigation of the humoral immune response to MUC2 in patients with mucinous carcinomas Vergleich der Expression von p53 und MUC2 in muzinösen und nichtmuzinösen Karzinomen von Mamma, Pankreas, Ovar und Kolon und Untersuchung der humoralen Immunantwort auf MUC2 bei Patienten mit muzinösen Karzinomen
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Abstract Are mucinous and nonmucinous carcinomas two distinct groups with different genetic lesions? To confirm this hypothesis the expression of MUC2 and of p53 was immunhistochemically investigated in 20 mucinous and nonmucinous carcinomas of the colon, pancreas, breast and ovary. P53-Expression was detectable in 39-64 per cent of the mucinous carcinomas of the colon, pancreas, breast and ovary, and in 57-72 per cent of the nonmucinous carcinomas of these organs. Thus, the mucinous carcinomas showed expression of the p53 gene with a lower frequency than the nonmucinous carcinomas, but this difference was significant only in the subgroup of colonic carcinomas. The mucinous carcinomas of the colon, pancreas, breast and ovary showed MUC2 expression with a higher frequency than the nonmucinous carcinomas. This difference was overall significant. In ovarian, pancreatic and breast tissue where MUC2 is normally absent, the development of a mucinous carcinoma is associated with de novo expression of MUC2. This shows, that the tumors of the pancreas, ovary and colon classified upon their morphology as mucinous tumors share similarities also on the molecular level. These characteristics differentiate the mucinous carcinomas from the nonmucinous carcinomas but without forming two discrete groups. Only the mucinous carcinomas of the breast differ in 100 per cent from the nonmucinous carcinomas by de novo expression of MUC2. An inverse correlation between expression of p53 and MUC2 as an indicator of possible interaction between p53 and MUC2 could be excluded. To detect humoral immunoreactivity against overexpressed MUC2 18 sera of patients exhibiting mucinous carcinomas were investigated if they show reactivity with a peptide out of the MUC2 core protein. None of the investigated patient?s sera did react specifically with the MUC2 peptide.

Table of Contents Download the whole PhDthesis as a zip-tar file or as zip-File For download in PDF format click the chapter title Titelblatt und Inhaltsverzeichnis I. Einleitung 6 1 Mechanismus der Tumorentstehung 6 1.1 Tumorsuppressorgen p53 7 2 Muzine 9 2.1 MUC2 10 2.1.1 Charakterisierung und Struktur von MUC2 10 2.1.2 MUC2-Expression in Normalgeweben und gutartigen Neubildungen 10 3 Besondere Merkmale muzinöser Karzinome 11 3.1 Genetische Besonderheiten 11 3.2 Phänotypische Besonderheiten 13 4 Immunantwort auf tumorassoziierte Antigene 14 4.1 Zellulaere Immunantwort 15 4.2 Humorale Immunantwort 15 II. Fragestellung 17 III. Material und Methoden 18 1 Immunhistochemische Untersuchung 18 1.1 Gewebe fuer Immunhistochemie 18 1.2 Histologische Typisierung der Gewebe 18 1.3 Tumorstadien und Differenzierung 18 1.4 Immunhistochemische Faerbung mit der ABC-Methode 19 1.5 Färbung mit dem anti-MUC2 Antikörper 4F1 19 1.6 Färbung mit dem anti-p53 Antikörper CM1 20 1.7 Auswertung der Immunhistochemie 20 2 Untersuchung von Humanseren 20 2.1 Herstellung von rekombinantem smuc41-Protein 20 2.1.1 Das pQE Protein-Expressionssystem 21 2.1.2 Herstellung einer Expressionskultur von M15(pREP4)pQE30/smuc41 21 2.1.3 Reinigung von smuc41-Protein über Nickelaffinitaetssaeule 22 2.1.4 Das pET Protein-Expressionsystem (Novagen) 22 2.1.5 Herstellung einer Expressionskultur von BLR(DE3)pLysS pET24a+ 23 2.1.6 Reinigung von smuc41-Protein ueber Immunaffinitaetssaeule 23 2.1.7 Herstellung von mit Bakterienlysat praeadsorbiertem Serum 24 2.2 SDS-PAGE 24 2.3 Western Blot 25 2.3.1 Blotentwicklung mit Alkalischer Phosphatase 25 2.3.2 Blotentwicklung mit Peroxidase/Lumineszenz 26 3 Chemikalien 26 4 Puffer und Loesungen 27 5 Sonstige Materialien 29 6 Geraete 29 IV. Ergebnisse 30 1 p53-Expression 30 1.1 Kolonkarzinome 30 1.2 Mammakarzinome 32 1.3 Ovarialkarzinome 33 1.4 Pankreaskarzinome 35 2 Expression von MUC2 39 2.1 Kolonkarzinome 39 2.2 Mammakarzinome 41 2.3 Ovarialkarzinome 42 2.4 Pankreaskarzinome 44 3 Korrelation zwischen p53- und MUC2-Expression 48 4 Humorale Immunantwort auf MUC2 in Patienten mit muzinoesen Karzinomen 50 4.1 Untersuchung des Serums des Patienten BRM mit smuc41-Protein, erhalten aus dem pQE-Expressionssystem 50 4.2 Untersuchung von Patientenseren mit smuc41-Protein, erhalten aus dem pET-Expressionssystem 53 4.2.1 Reinigung von smuc41 mit dem pET-Expressionssystem 53 4.2.2 Untersuchung der Seren der Patienten KRA, LES, BRU, POT,GEI 54 4.2.3 Untersuchung der Seren der Patienten LES, POT, BRM 55 5 Zusammenfassung 58 V. Diskussion 59 1 Expression des p53 Proteins 59 2 Expression des MUC2 Proteins 63 3 Korrelation der Expression der Antigene p53 und MUC2 63 4 Einfluss der Muzine auf Tumorenstehung und Prognose 64 5 Untersuchung der humoralen Immunitaet gegen MUC2 65 VI. Literaturverzeichnis 67

More Information:
Online available:	http://www.diss.fu-berlin.de/2001/154/indexe.html
Language of PhDThesis:	german
Keywords:	p53, MUC2, humoral immune response, mucinous carcinomas
DNB-Sachgruppe:	33 Medizin
Date of disputation:	14-Jul-2001
PhDThesis from:	Fachbereich Humanmedizin, Freie Universität Berlin
First Referee:	Prof. Dr. Christoph Hanski
Second Referee:	Prof. Dr. Walter Zidek
Contact (Author):	mhofmeier@nikocity.de
Date created:	15-Aug-2001
Date available:	31-Aug-2001

 

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